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    qPCR中的相對定量是什么?

    發(fā)布時(shí)間: 2021-10-14  點(diǎn)擊次數(shù): 2712次

    相對定量常用于測定兩個(gè)不同樣品中靶基因量的差異,例如使用實(shí)時(shí)RT-PCR法定量檢測mRNA水平的實(shí)驗(yàn)。


    進(jìn)行相對定量實(shí)驗(yàn)分析兩個(gè)不同樣品的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí),需要對數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理,設(shè)置其中一個(gè)樣品的靶基因表達(dá)量為“1"。這個(gè)樣品稱為校準(zhǔn)品,常使用表達(dá)恒定的內(nèi)參基因。


    通常,校準(zhǔn)品歸一化后,待測樣品靶基因表達(dá)量以比“1"增加或降低n倍來表示,來顯示表達(dá)量的差異。

    qPCR中的相對定量是什么?

    值得注意的是,實(shí)驗(yàn)必須從等量原料中取得校準(zhǔn)品和待測樣品的靶基因,否則比較無意義。


    與絕對定量相比,相對定量實(shí)驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)在于內(nèi)參基因的使用,能規(guī)避實(shí)驗(yàn)操作產(chǎn)生的差異,而且不需要制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。


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